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          如何快速找回之前觀察過的細(xì)胞

          更新時間:2016-03-29   更新時間:2016-03-29   點(diǎn)擊次數(shù):3453次

          前言

                無論原發(fā)性腫瘤還是繼發(fā)性腫瘤,一旦生長直徑超過1~2 mm,都會有血管生成。這是由于腫瘤細(xì)胞自身可分泌多種生長因子,誘導(dǎo)血管生成。多數(shù)惡性腫瘤的血管生成密集且生長迅速。因此,血管生成在腫瘤的發(fā)展轉(zhuǎn)移過程中起到重要作用,抑制這一過程將能明顯阻止腫瘤組織的發(fā)展和擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。于是體外的血管生成實驗就能很好的模擬腫瘤的血管發(fā)生過程,并且適合研究藥物對這一過程的影響實驗。本實驗HUVEC細(xì)胞為例,介紹這一實驗的詳細(xì)過程。

              圖1   培養(yǎng)皿底部帶計數(shù)格坐標(biāo)

          圖2   培養(yǎng)皿底部計數(shù)格的示意圖

          步驟:找到感興趣的細(xì)胞后,記下細(xì)胞的坐標(biāo)信息(橫坐標(biāo)是字母,縱坐標(biāo)是數(shù)字),下次再觀察時,根據(jù)坐標(biāo)信息找到細(xì)胞的位置,即可繼續(xù)觀察同一個細(xì)胞。

          拓展應(yīng)用:

          1.底部的計數(shù)格可直接用于細(xì)胞計數(shù),計數(shù)細(xì)胞無需轉(zhuǎn)移到計數(shù)板了;

          圖3  邊長500微米的計數(shù)格


          圖4  邊長50微米的計數(shù)格

           

          2.鎖定感興趣的細(xì)胞,直接在培養(yǎng)皿里做免疫熒光實驗


          圖5   小鼠免疫熒光染色效果(使用ibidi 35毫米培養(yǎng)皿的實驗效果)


          如何選擇不同規(guī)格的計數(shù)格培養(yǎng)皿/載玻片?
          根據(jù)實驗?zāi)康膩恚?br />

          *指倒置熒光顯微鏡,共聚焦顯微鏡等顯微鏡
          **使用玻璃底的產(chǎn)品還可以有配套的蓋子進(jìn)行DIC活細(xì)胞成像
               

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